Mae'r problemau a'r atebion cyffredin yn y broses synthesis peptid yn cynnwys yr agweddau canlynol:
Cynnwys peptid: Mae cynnwys peptid yn cyfeirio at ganran y sylweddau peptid mewn sampl o'i gymharu â sylweddau nad ydynt yn peptid. Mewn cynhyrchion peptid, yn ogystal â'r peptid ei hun, mae cydrannau nad ydynt yn halen a gyflwynwyd yn ystod y broses gynhyrchu, megis dŵr, toddyddion wedi'u hamsugno, ïonau cydgysylltu a halwynau, hefyd wedi'u cynnwys.
Sefydlogrwydd cemegol:
Adwaith deamidation: Mae gweddillion Asn/Gln yn hawdd eu hydroleiddio i ffurfio Asp/Glu.
Hydrolysis: Mae bondiau peptid mewn peptidau yn cael eu torri'n hawdd gan hydrolysis, yn enwedig y rhai a ffurfiwyd gan gyfranogiad Asp, yn enwedig bondiau peptid Asp Pro ac Asp Gly.
Adwaith racemization: Mae gan bob gweddillion asid amino ac eithrio Gly atomau carbon alffa cirol ac maent yn dueddol o gael adwaith rasio o dan gatalysis alcalïaidd. Mae gweddillion Asp yn fwyaf tebygol o gael adweithiau rasio.
- diraddio dileu: gellir diraddio Cys, Ser, Thr, Phe, Tyr a gweddillion eraill trwy - dileu, sy'n fwy tebygol o ddigwydd ar pH alcalïaidd ac sy'n cael ei effeithio gan dymheredd ac ïonau metel
Sefydlogrwydd corfforol:
Dadnatureiddio, arsugniad, agregu neu wlybaniaeth: Mae dadnatureiddio peptidau fel arfer yn gysylltiedig â dinistrio'r strwythurau trydyddol ac eilaidd. Yn y cyflwr dadnatureiddio, mae peptidau yn fwy tueddol o gael adweithiau cemegol ac mae'n anodd adfer eu gweithgaredd. Mae gan y canolradd a ffurfiwyd yn ystod y broses ddadnatureiddio hydoddedd isel ac mae'n dueddol o agregu a dyddodiad
cadwraeth:
Yr amodau storio gorau: Yn gyffredinol, mae peptidau'n cael eu storio ar ffurf powdr rhewi-sychu, sy'n sefydlog iawn ar -20 gradd, yn enwedig ar ôl rhewi-sychu a'u storio mewn sychwr gradd -20. Gellir storio'r rhan fwyaf o beptidau ar y tymheredd hwn am sawl blwyddyn heb newid. Er mwyn lleihau effaith lleithder, dylid adfer peptidau rhewi-sych i dymheredd ystafell o dan amodau sych cyn dod i gysylltiad ag aer.
Pecynnu: Mae Hesheng Biotechnology yn argymell pecynnu bach i osgoi cylchoedd rhewi-dadmer dro ar ôl tro, lleihau nifer yr agoriadau a chau cynwysyddion, a thrwy hynny leihau'r siawns o drin amhriodol neu halogiad bacteriol, a sicrhau sefydlogrwydd peptidau
Profi purdeb:
Gwarant purdeb: Mae'r holl peptidau a ddanfonir wedi cyrraedd y purdeb gofynnol, a bydd peptidau nad ydynt yn cwrdd â'r safon yn cael eu taflu. Gall canlyniadau canfod HPLC ac MS wirio purdeb a phwysau moleciwlaidd y peptid, wrth arddangos y prif amhureddau.
Gall dulliau canfod eraill, megis dadansoddiad asid amino neu ddadansoddiad elfennol, gadarnhau cyfansoddiad asid amino peptidau fel dull atodol o gadarnhau peptidau
Technoleg synthesis:
Synthesis peptid cyfnod solet: Nid oes angen puro cynhyrchion canolradd ar synthesis peptid cyfnod solet, gan ganiatáu ar gyfer prosesau synthesis parhaus a gosod y sylfaen ar gyfer awtomeiddio synthesis peptid. Yn seiliedig ar synthesis cemegol Fmoc, cafodd y peptid targed ei syntheseiddio trwy gysylltu grŵp carboxyl yr asid amino C-terminal â resin polymer anhydawdd, ac yna'n dechrau o grŵp amino yr asid amino
Mae'r cynnwys uchod yn crynhoi problemau a gwrthfesurau cyffredin mewn synthesis peptid, gan gwmpasu agweddau lluosog megis sefydlogrwydd cemegol, sefydlogrwydd corfforol, amodau storio, profion purdeb, ac ati.