Peptidau Biotin

Beth yw Peptidau Biotinylated?

Peptidau biotinylated yw peptidau sydd wedi'u haddasu i gynnwys moiety biotin. Mae'r addasiad hwn yn manteisio ar y rhyngweithio affinedd uchel rhwng biotin ac avidin neu streptavidin, a ddefnyddir yn helaeth mewn cymwysiadau biolegol a biocemegol. Mae'r moleciwl biotin yn fach, yn sefydlog, ac nid yw'n newid strwythur na swyddogaeth y peptid yn sylweddol, tra'n galluogi dal neu ganfod hynod effeithlon trwy systemau sy'n seiliedig ar avidin.

 

Addasu Cemegol
Mae biotin fel arfer yn cael ei gyflwyno trwy adweithydd biotin (N-hydroxysuccinimide biotin) y GIG, sy'n adweithio â grwpiau amin cynradd a geir ar derfynell N neu weddillion lysin y peptid, gan ffurfio bond amid sefydlog.

生物素（Biotin）肽（Peptid

COOH NH₂

| |

+---EDC/NHS---→ 活化羧基（ Actifadu） → 缩合（ Cyplu）

↓ ↓

Biotin-CONH-Peptid

 

Rhyngweithio Affinedd
Gall y peptid biotinylated glymu'n gryf (Kd ~ 10⁻¹⁵ M) i avidin neu streptavidin, gan ei wneud yn ddelfrydol i'w ddefnyddio mewn profion sy'n gofyn am ganfod, dal, neu ansymudiad manwl gywir.

Achosion Synthesis Peptid Biotinylated

Dilyniant Peptid: Biotin-Ahx-YXXXXXRXRRR-NH2

Hyd: 11A

Purity: >95%

M.W: 1898.32

Dilyniant Peptid: Biotin-YXXXXXXRXRRR-- ERXXXDLXXXXPVXXXXPRR

Hyd: 31A

Purity: >95%

M.W: 4145.89

 

Cymwysiadau Peptidau Biotinylated

Mae peptidau biotinylated yn offer amlbwrpas mewn ymchwil a diwydiant, gydag ystod eang o gymwysiadau, gan gynnwys:

Puredigaeth Affinedd

Fe'i defnyddir i buro partneriaid rhwymol fel proteinau, gwrthgyrff, neu asidau niwclëig trwy atal y peptid biotinylated ar gleiniau streptavidin.

ELISA a Western Blotting

Mae peptidau biotinylated yn gweithredu fel stilwyr ar gyfer canfod rhyngweithiadau penodol o'u cyplysu ag avidin-HRP neu avidin-labeli fflworoleuol.

Cyseiniant Plasmon Wyneb (SPR)

Fe'i defnyddir ar gyfer llonyddu peptidau ar sglodion biosynhwyrydd ar gyfer astudiaethau rhyngweithio.

Darganfod Cyffuriau

Sgrinio ymgeiswyr cyffuriau trwy ddadansoddi eu rhwymiad i dargedau peptid biotinylated.

Imiwnoleg

Defnyddir peptidau biotinylated i fapio epitopau, astudio rhyngweithiadau antigen-gwrthgyrff, a chynnal profion T-gell.

Mapio Epitope ar gyfer Datblygu Brechlyn

Defnyddiwyd peptid biotinylated pwrpasol i nodi epitopau antigenig o brotein firaol, gan helpu i ddylunio ymgeisydd brechlyn.

Protein-Astudiaethau Rhyngweithio Protein

Galluogodd peptidau biotinylated a ansymudwyd ar blatiau wedi'u gorchuddio â streptafidin astudio rhyngweithiadau ligand derbynyddion, gan ddatgelu cysylltiadau rhwymol sy'n hanfodol ar gyfer datblygu cyffuriau.

Optimeiddio Immunoassay

Mewn assay diagnostig, defnyddiwyd peptidau biotinylated fel antigenau i wella sensitifrwydd a phenodoldeb ELISA ar gyfer canfod biomarcwyr clefyd.

 

Cyfeiriadau

1. Gwyrdd, NM (1975).Avidin a streptavidin.Cylchgrawn Biocemegol, 131(3), 781-791.

2. Chaiet, L., & Wolf, FJ (1964).Priodweddau streptavidin, protein rhwymo biotin a gynhyrchir gan Streptomyces.Archifau Biocemeg a Bioffiseg, 106(1), 1-5.

3. Finn, FM, & Titus, G. (1994).Biotinylation proteinau mewn ymchwil a biotechnoleg.Biocemeg rhefrol, 218(1), 1-7.